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在微生物發(fā)酵中，因其分布廣和體積小等特性，導致染菌的因素也多樣。所以我們無法在實驗中及時判斷是否染菌，只有培養(yǎng)一段時間才能發(fā)現(xiàn)，最后也只能作廢，十分影響實驗進度及成本。因此，為了確保不會染菌和實驗的順利，在操作前也要按照規(guī)范進行無菌操作。除了之前對于發(fā)酵罐體的滅菌操作，在接種時更是要注意。
 

1. 發(fā)酵罐的接種量
首先需要注意把控接種量，適宜的接種量可幫助罐內(nèi)的菌種繁殖，發(fā)酵產(chǎn)物快速生成，同時也可減少雜菌生長。但過大過小都會影響產(chǎn)物繁殖。
l 接種量過大時，由于發(fā)酵罐內(nèi)的營養(yǎng)和氧氣量是一定，而菌種過量，會很容易導致發(fā)酵罐內(nèi)溶氧不足，還會有大量的代謝物，產(chǎn)物合成受到阻礙；
l 接種量過小時，發(fā)酵液中培養(yǎng)物不足，發(fā)酵時間推遲，發(fā)酵罐的生產(chǎn)效率大大降低
那么，究竟如何確定接種量呢？其實也就是將接種液體體積和之后的培養(yǎng)液體積。按照規(guī)定百分比確定即可。

 
2.發(fā)酵罐的接種方式
其次就是接種的方法。對于大型的工業(yè)化生產(chǎn)通常是采用發(fā)酵罐的壓力差來進行接種。而對于小型發(fā)酵罐則是采用另外兩種方式進行接種：火焰接種和注射器接種。
 

注射器接種
步驟1 將接種口和周圍用酒精棉進行消毒，操作者雙手也要消毒
步驟2 調(diào)節(jié)發(fā)酵罐罐壓（具體操作見下篇）
步驟3 準備好無菌的注射器（提前在超凈臺吸入菌種液體），無菌操作將種子液安全注入發(fā)酵罐內(nèi)。
此種接種方式可以避免菌種與外界空氣接觸，避免了明火使用，適用于5L以下的小型發(fā)酵罐。
 
今天先帶大家了解其中一種接種方式，繼續(xù)關注霍爾斯（HOLVES），下篇接著講述。